Milieu de culture : Gélose de SLANETZ et BARTLEY

Gélose de Slanetz et Bartley

Domaine d'utilisation 

La gélose Slanetz et Bartley permet d'effectuer le recherche et le démembrement des entérocoques intestinaux dans les eaux potables, les eaux de piscines et les eaux de baignades par la méthode de membrane filtrante.

Milieu de base

        Composition du milieu de culture

                                   Formule en grammes par litre d'eau distillée

Tryptose	20.0 g
Extrait autolytique de levure	5.0 g
Glocose	2.0 g
Phosphate dipotassique	0.4 g
Azide de sodium	0.4 g
Agar agar bactériologique	10.0 g

         Contrôle de qualité analytique:

Le milieu de base déshydraté se présente sous forme d'une poudre blanc-crème, fluide et homogène.

             Mode de préparation du milieu de base:

• Mettre en suspension, dans un contenant stérile, 41.4 g de milieu déshydraté dans 1 litre d'eau distillée.
• porter à ébullition lentement sur un agitateur chauffant jusqu'à dissolution complète.
• Répartir stérilement à raison de 100 mL par flacon (ou un volume supérieur selon le besoin d'utilisation).

NB : Si nécessaire le milieu de base peut être autoclavé à 110 + ou - 1°C pendant 20 minutes.

         Mode de conservation du milieu de base:

Le milieu de base ( sans TTC) peut être conservé en flacon au maximum 3 mois à 4 à l'obscurité.

Supplément TTC 50 mg :

          Composition du supplément

Un flacon de supplément sous forme lyophilisé est constitué par 

Triphényltétrazolium

50 mg

         Mode de reconstitution du supplément TTC 50 mg

• Reprendre le lyophilisat en y ajoutant aseptiquement 5 ml d'eau distillée stérile (si nécessaire 1 ml en plus pour le rinçage).
• Agiter le flacon plusieurs fois de façon à assurer une complète dissolution et d'une manière à éviter la formation de mousse.

       Mode de conservation du supplément TTC 50 mg reconstitue

Une fois le supplément TTC reconstitué, le produit peut être conservé à 4 + ou - 2°C pendant 1 mois à l'obscurité.

Milieu de culture complet :

        Mode de préparation du milieu de culture complet 

• Faire fondre (à température d'ébullition) le milieu de culture de base.
• Refroidir et maintenir le milieu à 47 + ou - 2°C.
• Ajouter stérilement 1 mL supplément TTC (50 mg) reconstitué par flacon de 100 mL de milieu de culture de base,
• Agiter parfaitement de manière à éviter la formation de mousse et avoir un milieu homogène.
• Couler en boites de pétri stériles (environ 9 à 10 mL de milieu complet par boite).
• Laisser solidifier sur une surface plane.

          Contrôle de qualité analytique:

• Milieu préparé complet se présente sous forme d'une gélose ambré à rose orangé.
• Le pH final, du milieu de culture prêt à l'emploi doit être de 7.2 + ou - 0.2 à 25°C.
• Réponse culturale typique après 24 à 48 heures d'incubation 

                 - Bonne croissance : Enterococcus faecalis.

                 - Croissance inhibée : Escherichia coli, Staphylococcus aureus

         Mode de conservation du milieu de culture complet:

Le milieu de culture (complet avec le TTC) prêt à l'emploi (coulé en boites de Pétri, diamètre 55mm), peut être conservé au maximum 8 jours à  4 + ou - 2°C à l'obscurité.

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